کیت تشخیصی افتراقی HSV1/2

ویروس‌های هرپس سیمپلکس ۱ و ۲ (HSV-1 و HSV-2) از مهم‌ترین ویروس‌های بیماری‌زای انسانی و دو عضو بسیار مهم از خانواده‌ی Herpesviridae هستند و همراه با ویروس Varicella-zoster (VZV)، تحت عنوان alphaherpesviridae طبقه بندی می شوند. HSV-1 و HSV-2 دارای ژنوم DNA دو رشته ای خطی و به طول تقریبی  kbp150 هستند که با یک کپسید پروتئینی با تقارن ۲۰ وجهی احاطه شده‌اند و در بیش از ۸۰٪ ناحیه‌ی کدکننده‌ی پروتئین ژنوم خود با یکدیگر اشتراک دارند.

عفونت‌های HSV در سرتاسر جهان بدون توزیع فصلی رخ می دهند. اگرچه عفونت HSV معمولاً بدون علامت است، اما می تواند طیف گسترده ای از علائم بالینی، از جمله تبخال دهان، تبخال تناسلی، تبخال نوزادی، آنسفالیت و تبخال چشمی را ایجاد کند.

این ویروس‌ها بسیار شایع و مسری هستند و از طریق تماس مستقیم با ترشحات حاوی ویروس مانند بزاق و ترشحات دستگاه تناسلی منتقل می‌شوند. شیوع  عفونت HSV-2 به تدریج از دوران کودکی افزایش می‌یابد و در سال‌های بعد به 80 درصد و بیشتر می‌رسد، در حالی که تا نوجوانی، نمونه‌های خونی کمی از مبتلایان، HSV⁺ می‌شوند.

اکثر عفونت های اولیه‌ی HSV-1 به صورت عفونت های خفته یا ناشناخته بروز پیدا می‌کنند. عفونت های اولیه با HSV-2 به طور معمول به صورت تبخال تناسلی ظاهر می شوند. عفونت اولیه با HSV-1 یا HSV-2، تاخیر در ایجاد گانگلیون‌ ریشه پشتی را به دنبال دارد. به طور دوره‌ای، ویروس دوباره فعال می‌شود و از طریق آکسون عصبی به محل‌های دهان یا تناسلی می‌رود، در نتیجه ویروس عفونی آزاد شده و در برخی موارد، ضایعه ایجاد می‌شود.

شماره رفرانس

BONHSV1/2-24

BONHSV1/2-96

شرح کیت

کیت تشخیصی HSV بر اساس واکنش زنجیره‌ای پلیمراز (PCR) به صورت Real-Time  ساخته­ شده­ است. این محصول برای تشخیص در شرایط آزمایشگاهی و برای تشخیص افتراقی ویروس HSV1 و HSV2 تهیه شده است. نتایج تشخیصی به‌دست‌آمده توسط این محصول باید همراه با سایر داده‌های بالینی یا آزمایشگاهی تفسیر شوند.

اصول

تشخیص پاتوژن توسط واکنش زنجیره‌ای پلیمراز (PCR) بر اساس تکثیر مناطق خاص ژنوم ویروس می­باشد. در واکنش Real-Time PCR محصول تکثیر شده از طریق فلوروسنت شناسایی می‌شوند. مشاهده شدت فلوروسنت در حین واکنش PCR (به صورت Real-Time) تشخیص محصولات در حال تکثیر را بدون نیاز به باز­کردن مجدد لوله­ های واکنش پس از اجرای PCR ممکن می‌سازد. کیت تشخیصی HSV در قالب یک پلتفرم مولتی پلکس شامل سه ست پرایمر و پروب طراحی شده است که قادر به تشخیص همزمان افتراقی دو ویروس HSV1  و HSV2 به ترتیب با فلوروفور هایFAMو TEXAS RED می باشد. در این کیت از یک اندوژن انسانی به عنوان کنترل داخلی با فلوروفور HEX به منظور کنترل دقت در پروسه استخراج و سمپلینگ استفاده شده است همچنین وجود کنترل داخلی، از گزارش منفی کاذب حاصل از مهار PCR پیشگیری میکند.

موارد کاربرد

کیت تشخیصی HSV در شناسایی و تشخیص افتراقی ویروس HSV1 و HSV2 در بیماران به ویژه با علایم بالینی به صورت زخم یا ضایعات در ناحیه تناسلی، مقعد یا ران کاربرد دارد.

ویژگیهای کیت HSV شرکت بن یاخته به شرح زیر است:

اختصاصیت بالا

• طراحی شده براساس ناحیه‌ی محافظت شده­‌ی ژنوم HSV1/ HSV2
• دارای اختصاصیت 100%

تشخیص دقیق کیفی

• قابلیت تشخیص کیفی افتراقی HSV1 و HSV2

کنترل داخلی اندوژن

• کنترل کلیه­‌ی فرآیند PCR و استخراج از طریق کنترل داخلی اندوژن بدون نیاز به افزودن اگزوژن

حساسیت بالا

• حساسیت آنالیتیکال برای HSV-1 برابر با 0.4 کپی/ میکرولیتر (95% فاصله اطمینان) و حساسیت آنالیتیکال برای تشخیص HSV-2 برابر با 2.5 کپی/ میکرولیتر است (95% فاصله اطمینان) است.

مسترمیکس آماده­‌ی مصرف

• تضمین تکرار پذیری نتایج آزمایش
• سازگار با طیف گسترده ای از دستگاه‌های Real-time PCR از جمله، Rotor Gen 3000,6000، MIC و ABI Quantstudio Real-time PCR System
• حاوی 1 مستر میکس واجد تمامی ترکیبات مورد نیاز برای واکنش PCR (جدول زیر)
• بدون نیاز به اضافه کردن مواد ضروری برای انجام تست PCR
•  

• Yellow(IC)	Orange(TEX)	Green(FAM)
  +	–	+	HSV-1 Detected
  +	+	–	HSV-2 Detected
  +	–	–	HSV NOT Detected
  –	–	–	Invalid

  بعد از آنالیز نتایج به صورت زیر تفسیر می گردد:

  1. نمونه زمانی مثبت می‌شود که دارای دو شرط  باشد: دارای منحنی سیگموئیدی و فاز لگاریتمی باشد.
• 2.  میزان Ct آنها کمتر از 40 باشد.

  با توجه‌ به موارد بالا، نتیجه منفی یک نمونه، مستلزم داشتن IC با CT ≤30 در کانال نارنجی و جواب منفی برای بقیه کانال ها است.

   

  • در آنالیز HSV، در صورت مشاهده‌ی اختلاف سیکل کمتر از 10 سیکل بین دو نوع HSV-1 وHSV-2، نمونه دارای هر دو واریانت HSV-1 وHSV-2 می باشد. در اختلاف بیشتر از 10 سیکل ، ویروس با سیکل آستانه ای کمتر  مثبت  می باشد.