کیت تشخیصی ویروس Rubella

ویروس روبلا (Rubella virus) عامل بیماری سرخجه و از خانواده Togaviridae است. ذرات ویروس روبلا اندازه ای در حدود 50 تا 70 نانومتر دارند که توسط پوششی احاطه شده اند. درون کپسید پروتئینی، ژنوم خطی ویروس که RNA تک رشته ای مثبت به طول تقریبی 10k bp می باشد، وجود دارد.

تنها میزبان ویروس روبلا، انسان است و انتشار آن از طریق قطرات تنفسی آلوده می باشد؛ در دستگاه تنفسی، ویروس روبلا، غدد لنفاوی و سلول های اپیتلیال نازوفارنکس را هدف قرار داده و از طریق گلیکوپروتئین های سطحی پوشش، به سلول های میزبان متصل و وارد میشود. سپس ژنوم آن به عنوان الگویی برای ترجمه ی پروتئین های غیرساختاری نظیر آنزیم ها استفاده شده که پلی پپتید بزرگی را میسازد که به زنجیره ها و پروتئین های کوچک تر شکسته میشود. آنزیم پلی مراز ویروسی شروع به ساختن رشته ی منفی ژنوم ویروس میکند که بعدا منجر به ساخته شدن mRNAهای ویروسی شده و پروتئین های ساختاری مانند کپسید و پروتئین های پوشش ساخته میشوند. در نهایت پس از مونتاژ شدن کپسید و قرارگیری ژنوم های جدید در آن، ذرات ویروسی با جوانه زدن از سلول خارج شده و به این ترتیب، پوشش غشایی خود را به دست می آورند.

ویروس میتواند یک هفته پس از ابتلا، درخون منتشر و بعد از یک دوره ی نهفتگی 3-2 هفته ای، علائم بیماری را نظیر تب، راش های پوستی، التهاب و قرمزی چشم، گرفتگی و آبریزش بینی و درد مفاصل و … بروز دهد.

اگرچه تظاهرات بالینی این عفونت معمولا ملایم است، بیماری سرخجه در سه ماهه اول بارداری در مادران مبتلا میتواند اثرات مخربی بر روی جنین داشته باشد. آلودگی جنین در رحم ممکن است منجر به مرگ یا سندرم سرخچه (CRS) شود. عفونت در نوزادان تازه متولد شده ممکن است باعث بیماری های قلبی، مغزی، شنوایی یا بینایی شود.

شماره رفرانس

BONRV-24

BONRV-96

شرح کیت

این کیت بر اساس واکنش زنجیره‌ای پلیمراز (PCR) به صورت Real-Time  ساخته شده است. این محصول برای تشخیص در شرایط آزمایشگاهی ویروس سرخجه (Rubella virus) طراحی شده است. نتایج تشخیصی به‌دست‌آمده توسط این محصول باید همراه با سایر داده‌های بالینی یا آزمایشگاهی تفسیر شوند.

اصول

تشخیص پاتوژن توسط واکنش زنجیره‌ای پلیمراز (PCR) بر اساس تکثیر مناطق خاص ژنوم ویروس می­باشد. در واکنش Real-Time PCR محصول تکثیر شده از طریق فلوروسنت شناسایی می‌شوند. مشاهده شدت فلوروسنت در حین واکنش PCR (به صورت Real-Time) تشخیص محصولات در حال تکثیر را بدون نیاز به باز­کردن مجدد لوله­ های واکنش پس از اجرای PCR ممکن می‌سازد.

دامنه کاربرد

این کیت به منظور تشخیص مولکولی بیماری سرخچه به ویژه در 3 ماهه اول بارداری در خانمهای باردار کاربرد دارد.

ویژگیهای کیت روبلا به شرح زیر است:

اختصاصیت بالا و تشخیص دقیق کیفی

• طراحی شده براساس ناحیه‌ی محافظت شده­‌ی ژنوم
• تشخیص طیف وسیعی از زیر مجموعه‌های روبلا
• دارای اختصاصیت 100%

کنترل داخلی اگزوژن

• کنترل کلیه­‌ی فرآیند PCR و استخراج از طریق کنترل داخلی (IC) موجود در کیت

حساسیت بالا

• حد تشخیص تحلیلی کیت Senmurv Rubell virus PCR در دستگاهRotor-Gene Q برابر با   Copy/µl =1 می باشد. این به این معنی است که به احتمال 95% در هر واکنش 5 Copy/reaction شناسایی گردد.

مسترمیکس آماده­‌ی مصرف

• مستر میکس حاوی تمامی مواد تشکیل دهنده‌­ی مورد نیاز برای واکنش PCR
• بدون نیاز به اضافه کردن مواد ضروری برای انجام تست PCR
• تضمین تکرار پذیری نتایج آزمایش
• سازگار با طیف گسترده ای از دستگاه‌های Real-time PCR از جمله، Rotor Gen 3000,6000، MIC و ABI Quantstudio Real-time PCR System

آنالیزنتایج Rotor-Gene 

1. آنالیز نتایج توسط نرم افزار مربوطه و بر اساس دستورالعمل دستگاه انجام شود. در هر کانال رنگی، آستانه را در بازه‌ی 0.02 قرار دهید و گزینه ی Slope Correct را فعال کنید:

نتایج به صورت زیر تفسیر می شود:

1. سیگنال فلورسانس در کانال های Green کاملا مشخص است. نتیجه تست   Rubella مثبت است و نمونه تخلیص شده ویروس Rubella بوده است. 
2. هیچ سیگنال فلورسانسی در کانال های Green مشاهده نمیشود. در همین حین سیگنال در کانال نارنجی مربوط به کنترل داخلی دارای منحنی سیگموییدی و CT  بین 28 تا 34 می باشد. در این حالت نمونه منفی در نظر گرفته می شود.
3. هیچ سیگنال فلورسانسی در کانال Greenو Orange قابل مشاهده نیست. در این حالت هیچ گونه نتیجه گیری در مورد تست نمیتوان انجام داد. تست باید دوباره تکرار شود.