تنها کرونا ویروسی که ماکیان را آلوده می کند به عنوان IBV شناخته می شود. IBV یکی از شناخته شده ترین گاماکرونا ویروس­ها محسوب می­شود. این ویروس یکی از مهمترین علل نگرانی های اقتصادی محسوب می­شود. واکسیناسیون به طور گسترده ای برای کنترل IBV استفاده می شود. واکسن برای سلامت جوجه ها و هم مرغ های گوشتی هم مرغ های تخم گذار مفید است. واکسن­های غیر فعال شده در امولسیون های روغنی جهت واکسیناسیون مرغ های گوشتی و مرغ های تخم­گذار پیش از تخم گذاری مورد استفاده قرار می­گیرد. سویه­ های ژنوتیپ های بسیار متنوعی در میان گونه­ ی کرونا ویروس ماکیان جا می­گیرند. برخی از این سویه ها تنها دستگاه تنفسی را بیمار می­کنند و سویه­ های دیگر می­توانند در سراسر بدن پراکنده شوند و کلیه ها یا مجاری تناسلی رو آلوده می­کنند.

شماره رفرانس

• BONIBV-25

• BONIBV-50

شرح کیت

این کیت بر اساس واکنش زنجیره‌ای پلیمراز (PCR) به صورتReal-Time ساخته­ شده­ است. این محصول برای تشخیص در شرایط آزمایشگاهی تهیه شده و برای تشخیص بیماری برونشیت عفونی پرندگان نتایج تشخیصی به‌دست‌آمده توسط این محصول باید همراه با سایر داده‌های بالینی یا آزمایشگاهی تفسیر شوند.

اصول

تشخیص پاتوژن توسط واکنش زنجیره‌ای پلیمراز (PCR) بر اساس تکثیر مناطق خاص ژنوم ویروس می­باشد. در واکنش Real-Time PCR محصول تکثیر شده از طریق فلوروسنت شناسایی می‌شوند. مشاهده شدت فلوروسنت در حین واکنش PCR (به صورت Real-Time) تشخیص محصولات در حال تکثیر را بدون نیاز به باز­کردن مجدد لوله­ های واکنش پس از اجرای PCR ممکن می‌سازد.

موارد کاربرد

این کیت برای تشخیص آلودگی سویه های مختلف برونشیت (G19، MASS، B793) در گله های مشکوک با علایمی نظیر بیماریهای تنفسی و کاهش کیفیت و کمیت تولید تخم مرغ و با درگیری بافت های مختلف اپی تلیال نای ، اپی تلیال مجرای تخم در دستگاه تولید مثل و حتی کلیه کاربرد دارد.

کیت برونشیت پرندگان بن یاخته ئارای ویژگیهای زیر است:

اختصاصیت بالا

• طراحی شده براساس ناحیه‌ی محافظت شده‌­ی ژنوم برونشیت
• دارای اختصاصیت 100%

تشخیص دقیق افتراقی

• قابلیت تشخیص دقیق و افتراقی سویه های G19، MASS، B793

کنترل داخلی اندوژن

• کنترل کلیه‌­ی فرآیند PCR و استخراج از طریق کنترل داخلی طراحی شده در بخش حفاظت شده سویه ها (جنرال)

حساسیت بالا

• حداقل توان تشخیص 50copy/reaction   

مسترمیکس آماده­‌ی مصرف

• 3 مستر میکس آماده‌­ی مصرف برای 3 سویه برونشیت، حاوی تمامی مواد تشکیل دهنده­‌ی مورد نیاز برای واکنش PCR
• تضمین تکرار پذیری نتایج آزمایش
• سازگار با طیف گسترده‌ای از دستگاه‌های Real-time PCR از جمله، Rotor Gen 3000,6000، MIC و ABI Quantstudio Real-time PCR System

آنالیز نتایج

• آنالیز نتایج توسط نرم افزار مربوطه و بر اساس دستورالعمل دستگاه انجام شود. در کانال رنگی Green آستانه را در بازه‌ی مناسب قرار دهید. بدین ترتیب که با انتخاب گزینه­ ی Outlier removal در قسمت آنالیز داده ها، تیک مربوط به Reaction efficiency threshold را enable نمایید.

۲. تفسیر نتایج، بر مبنای اختلاف Ct واریانت‌های G19، MASS، B793 نسبت به Ct توالی General صورت می‌گیرد؛ بدین نحو که هر چه اختلاف Ct یک واریانت نسبت به Ct توالی General کمتر باشد، احتمال این که نمونه‌ی مورد آزمایش از نوع آن واریانت باشد بیشتر است.

بعد از آنالیز باید نتایج را به صورت زیر تفسیر کرد:

1. دارای منحنی سیگموئیدی و فاز لگاریتمی باشد.
2. زمانی که منحنی سیگموئیدی نباشد جواب نمونه منفی خواهد بود. به‌علاوه،Ct به‌دست‌آمده که بالای 30 باشد سبب پاسخ منفی خواهد شد.
3. واریانتی که به عنوان سویه‌ی اصلی بیماری‌زا شناسایی میشود،‌ باید نزدیکترین Ct به IBV-general وکمترین Ct را داشته )اختلاف Ct آن حداقل ۲ واحد کمتر از سایر سویه‌ها( باشد.

دمای Peak Melt نمونه بايد با Peak Melt Ntc تفاوت داشته باشد ( معمولا دمای Peak Melt Ntc حدود ٧٥ درجه است) در صورتيكه دمای Peak Melt Ntc و دمای Peak Melt نمونه با هم تطابق داشته باشند در صورتيكه اختلاف ct حدود ٥ سيكل باشد، تست معتبر است. در ادامه شکلهای مربوطه آمده است:

دمای Peak Melt محصول نمونه مثبت با Peak Melt Ntc (که مربوط به دایمر پرایمر می باشد) متفاوت است.

در صورتيكه دمای Peak Melt Ntc و دمای Peak Melt محصول نمونه مثبت با هم تطابق داشته باشند فقط در صورتيكه اختلاف ct حدود ٥ سيكل باشد، تست معتبر است.