کیت تشخیص مولکولی باکتری M. tuberculosis

سل یک بیماری مسری و مزمن است که توسط باکتری مایکوباکتریوم توبرکلوسیس(M. tuberculosis) ایجاد می شود. در سال ۱۹۳۳، این بیماری به دلیل شیوع گسترده در سراسر دنیا، به عنوان یک معضل بهداشت عمومی شناخته شد و تلاش‌ها برای ریشه‌کن کردن آن تاکنون ادامه یافته است؛ هرچند به دلیل مهاجرت افراد بیمار و مقاومت آنتی‌بیوتیکی، این بیماری همچنان به عنوان یکی از مهم‌ترین عفونت‌های واگیردار شناخته میشود.

سویه‌های حاد سل از جمله M. microti، M. caprae، M. canetti، M. bovis BCG، M. africanum و M. bovis باعث ایجاد عفونت در ریه و بافت‌های لنفاوی مرتبط می‌شوند. عفونت از طریق تنفس قطرات تنفسی حاوی پاتوژن و توسط افراد مبتلا به سل ریوی فعال منتقل میشود. پس از استنشاق، باکتری در کیسه‌های هوایی ریه مستقر شده و از طریق گردش خون لنفاوی و هماتوژن،‌ میتواند به سایر قسمت‌های ریه و گاهی سایر اندام‌ها انتشار یابد. شایع‌ترین شکل بیماری سل ریوی است؛ اگرچه رخداد سایر انواع بیماری مانند سل روده‌ای، استخوانی، مننژیت و غیره نیز گزارش شده است.

عفونت اولیه در ۱۰٪ افراد آلوده و در۸۰٪ مواقع، طی یک بازه‌ی ۲ ساله، شکل فعال بیماری را ایجاد میکند. در ۹۰٪ باقی‌مانده، سیستم ایمنی عفونت را کنترل میکند و فرد، عفونی یا بدون علائم نیست. تخمین زده می شود که یک سوم جمعیت جهان به سل نهفته مبتلا هستند؛ یعنی این افراد آلوده به باکتری هستند، اما هنوز بیمار نشده اند و با این‌ حال می توانند عفونت را منتقل کنند. در این حالت، باکتری‌های سل میتوانند تا سال‌ها به صورت غیرفعال بمانند. هنگامی که سیستم ایمنی ضعیف می شود، عفونت نهفته می تواند دوباره فعال شود.

هنگامی که شکل فعال بیماری رخ می دهد، علائم (سرفه، تب، تعریق شبانه، کاهش وزن و غیره) ممکن است برای چندین ماه خفیف باشد؛ به همین دلیل ممکن است بیماران برای مراجعه به پزشک تعلل کرده و به این ترتیب بیماری را به دیگران منتقل کنند. در طول یک سال، یک بیمار سل می تواند 10 تا 15 نفر را از طریق تماس نزدیک مبتلا کند. در صورت عدم دریافت درمان مناسب، نزدیک به دو سوم بیماران جان خود را از دست خواهند داد. استفاده از تکنیک‌های مولکولی برای تشخیص سریع‌تر، حساس‌تر و اختصاصی‌تر از روش‌های سنتی آزمایشگاهی، امکان بهبود دانش اپیدمیولوژی عفونت و تصمیم‌گیری برای کنترل آن را فراهم می‌کند.

شماره رفرانس

BONTB-24

BONTB-96

شرح  کیت 

این کیت بر اساس واکنش زنجیره‌ای پلیمراز (PCR) به صورت Real-Time  ساخته شده است. این محصول برای تشخیص در شرایط آزمایشگاهی تهیه شده و برای تشخیص سویه‌های حاد بیماری سل (M. microti، M. caprae، M. canetti،M. bovis BCG ، M. africanum، M. bovis)  طراحی شده است. نتایج تشخیصی به‌دست‌آمده توسط این محصول باید همراه با سایر داده‌های بالینی یا آزمایشگاهی تفسیر شوند.

اصول

تشخیص پاتوژن توسط واکنش زنجیره‌ای پلیمراز (PCR) بر اساس تکثیر مناطق خاص ژنوم باکتری می­باشد. در واکنش Real-Time PCR محصول تکثیر شده از طریق فلوروسنت شناسایی می‌شوند. مشاهده شدت فلوروسنت در حین واکنش PCR (به صورت Real-Time) تشخیص محصولات در حال تکثیر را بدون نیاز به باز­کردن مجدد لوله­های واکنش پس از اجرای PCR ممکن می‌سازد.

 موارد کاربرد

• این کیت در تشخیص سویه های حاد بیماری سل به ویژه در افرادی که در معرض تماس نزدیک با افراد شناخته شده مبتلا به سل هستند، کارکنان و پرسنل مراکز درمانی، افرادی که علائمی نظیر  سرفه مداوم، تعریق شبانه، کاهش وزن غیر قابل توجیه دارند، افردای که تصویر برداری غیر طبیعی اشعه ایکس داشته اند و همچنین در افرادی که اخیرا پیوند عضو داشتند یا افرادی که نقص سیستم ایمنی دارند مثل ایدز کاربرد دارد.
• کیت TB شرکت بن یاخته دارای ویژگیهای زیر است:

اختصاصیت بالا

• طراحی شده براساس ناحیه‌ی محافظت شده­‌ی ژنوم سویه‌های حاد بیماری سل (M. microti، M. caprae، M. canetti،M. bovis BCG ، M. africanum، M. bovis)
• دارای اختصاصیت 100%

تشخیص دقیق کیفی

• قابلیت تشخیص کیفی سویه‌های حاد

کنترل داخلی اگزوژن

• کنترل کلیه­‌ی فرآیند PCR و استخراج از طریق کنترل داخلی (IC) موجود در کیت

حساسیت بالا

• حد تشخیص تحلیلی کیت Senmurv M. tuberculosis PCR در دستگاه روتورژن 0.5 = Copy/ µl است. این به این معنی است که به احتمال 95% 5 Copy/reaction شناسایی گردد.

مسترمیکس آماده­‌ی مصرف

• مستر میکس حاوی تمامی مواد تشکیل دهنده‌­ی مورد نیاز برای واکنش PCR
• بدون نیاز به اضافه کردن مواد ضروری برای انجام تست PCR
• تضمین تکرار پذیری نتایج آزمایش
• سازگار با طیف گسترده ای از دستگاه‌های Real-time PCR از جمله، Rotor Gen 3000,6000، MIC و ABI Quantstudio Real-time PCR System

آنالیز نتایج

بعد از آنالیز  نتایج را به صورت زیر تفسیر نمایید:

• سیگنال فلورسانس در کانال (A.FAM=green) کاملا مشخص است.

نتیجه تست برای باکتری TB مثبت است و نمونه تخلیص شده از نمونه حاوی باکتری TB بوده است. در این حالت، وجود سیگنال فلورسانس در کانال نارنجی اهمیت ندارد زیرا در صورت بالا بودن غلظت اولیه ژنوم باکتری TB سیگنال در کانال نارنجی می­تواند بسیار ضعیف باشد یا اصلا وجود نداشته باشد.

• هیچ سیگنال فلورسانسی در کانال (A.FAM=Green channel) مشاهده نمی­­شود. در همین حین سیگنال در کانال نارنجی مربوط به کنترل داخلی دارای منحنی سیگموییدی و CT بین 28 تا 34 می باشد. در این حالت نمونه منفی در نظر گرفته می شود.
• هیچ سیگنال فلورسانسی در کانالFAMو کانال Orange قابل مشاهده نیست.

در این حالت هیچ گونه نتیجه گیری در مورد تست نمی­توان انجام داد.­ تست باید دوباره تکرار شود.