کیت افتراقی کرونا-آنفولانزا

آنفلوانزا و كرونا، عفونت هاي ویروسی مسری تنفسی هستند که می توانند علائم خفیف تا شدید مشابه با هم و عوارض تهدید کننده زندگی، از جمله مرگ، در بزرگسالان و حتی كودكان ایجاد کنند. آنفولانزا یکی از عفونت‌های سیستم تنفسی است که گوش، حلق و بینی افراد مبتلا را درگیر می‌کند. 4 نوع از ویروس آنفولانزا به نام‌های A و B و C و D وجود دارد. آنفولانزای نوع A و B باعث عفونت‌های فصلی می‌شوند  اگرچه بیشتر بیماران طی یک تا دو هفته بهبود می‌یابند؛ اما عفونت با ویروس‌های آنفولانزا می‌تواند سبب بیماری شدید و عوارض کشنده شود. آنفولانزا در زمانی که هوا روبه سردی و آلودگی می‌رود شیوع بیشتری پیدا می‌کند. علائم انفولانزا بسیار مشابه با سرماخوردگی است که با آبریزش بینی، عطسه و گلودرد همراه است. علائم انفولانزا ناگهانی بروز می‌کند اما علائم سرماخوردگی به تدریج بروز می‌کند. كيت حاضر  به روش Real-Time PCR،  مالتيپلكس با هدف شناسايي ويروس هاي تنفسی آنفلوانزای A/B و كرونا به صورت افتراقی و همزمان در يک تيوب، در افراد مشكوک به آلودگی ويروس تنفسی طراحی شده است. 

شماره رفرانس

BONFLUSC100

شرح کیت 

کیت حاضر به روش Real-time PCR مالتیپلکس و به صورت تک‌مرحله‌ای به منظور تشخيص همزمان و افتراقی ويروسهای SARS-CoV-2، آنفولانزای A و/یا آنفولانزای B در افراد مشکوک به آلودگی ویروس تنفسی طراحی شده است. آنفولانزا A با پروب متصل شده به فلوروفور FAM  در کانال سبز، آنفلوانزا B با پروب متصل شده به فلوروفور Cy5  در کانال قرمز و SARS-CoV-2 با فلوروفور ROX در کانال نارنجی تشخیص داده می شود. پروب متصل به کنترل داخلی متصل به فلوروفور HEX است که در کانال زرد شناسایی می گردد.

نتایج حاصل از آزمایش‌ این کیت تنها در کنار شواهد بالینی، برای تشخیص مستند است. تشخیص قطعی و درمان بیماران باید بر اساس ترکیب نتیجه این آزمایش با نتایج آزمایش‌های دیگر و سابقه پزشکی و همچنین نحوه پاسخ‌دهی به درمان صورت گیرد.

اصول کار 

طراحی پروب و پرایمر به گونه ای صورت گرفته که در یک مرحله و به طور همزمان قابلیت هدف قراردادن دو ژن N و RdRp را برای ویروس کرونا، ژن MP برای انفلوآنزای نوعA و ژن NS برای انفلوآنزای نوع B دارد که با استفاده از محلول واکنش PCR ،تکثیر این الگو می تواند به صورت کیفی از طریق افزایش سیگنال فلورسانس توسط دستگاه اندازه گیری شود. 

کیت کرونا/آنفولانزای بن یاخته دارای ویژگیهای زیر است:

اختصاصیت بالا

• طراحی شده براساس ناحیه‌ی محافظت شده‌­ی ژنوم
• قابلیت تشخیص همزمان هر سه ژن N, ویروس کرونا, ژن MP انفلوآنزای نوعA ، ژن NS انفلوآنزای نوع B و کنترل داخلی به ترتیب در فلوروفور های ROX و FAM و CY5 و HEX
• پرایمر و پروب اختصاصی طراحی شده برای ژنM2 / M1، برای شناسایی همه سروتیپ‌های شناخته‌شده انفلوآنزای A از جمله H1N1، H1N1pdm09،H3N2،H5N8 و H7N
• پرایمر و پروب اختصاصی برای ژن NS1 برای شناسایی هر دو نوع ویکتوریا و یاماگاتای انفلوآنزای B

کنترل داخلی اندوژن

• ژن RNase P به عنوان کنترل داخلی، به منظور کنترل فرایند استخراج RNA و PCR

حساسیت بالا

• دارای حساسیت 100 cp/ml برای انفلوآنزای A ، 200 cp/ml برای انفلوآنزای B و200 cp/ml برای COVID 19 ،با احتمال 95%  .

مسترمیکس آماده­‌ی مصرف

• مستر میکس آماده­‌ی مصرف، حاوی تمامی مواد تشکیل دهنده­‌ی مورد نیاز برای واکنش PCR
• تضمین تکرار پذیری نتایج آزمایش.
• سازگار با طیف گسترده‌ای از دستگاه‌های Real-time PCR از جمله، Rotor Gen 3000,6000، MIC و ABI Quantstudio Real-time PCR System

دارای تأییدیه مجوز اداره کل تجهیزات پزشکی

آنالیز نتایج

بر اساس دستور العمل‌ها و طبق جدول زیر نتایج را تفسیر نمایید.

• در دستگاه کوربت، گزینه slope correction را فعال نمایید.
• در آنالیز منحنی های تکثیر، فقط منحنی های سیگموئیدی قابل قبول هستند.

• کنترل منفی: نمونه NTC نباید در هیچ‌ یک از کانال‌های Green، Yellow ، Orange و Red دارای Ct  پایین‌تر از 35 باشد. در غیر این صورت واکنش فاقد اعتبار بوده و نیازمند تکرار است.
• کنترل مثبت: Ct کانال‌های Green، Yellow ، Orange و Red نمونه PTC باید کمتر از 30 باشد. در غیر این صورت واکنش فاقد اعتبار بوده و نیازمند تکرار است.
• مقادیر Ct ژن‌های  N، M و NS1 کمتر از35 مورد قبول بوده و مثبت تلقی می‌شوند.
• ممکن است چندین ویروس در یک نمونه تشخیص داده شوند.
• تست‌های با نتایج Invalid معتبر نبوده و نیاز به نمونه گیری مجدد و تکرار دارند.
• شناسایی Rnase P   برای نمونه های مثبت غیر ضروری است و تیتر بالای ویروس می تواند منجر به کاهش یا عدم حضور سیگنال مرتبط با Rnase P  در نمونه های مثبت گردد. 

جدول تفسیر نتایج