محصولات مرتبط: کیت تشخیص کیفی JAK2، کیت تشخیصی جهش V617F، کیت ریل تایم JAK2

ژن JAK2 کد کننده ی یک پروتئین تیروزین کیناز می باشد که در تحریک رشد سلولی و تقسیم نقش دارد. این نقش به طور ویژه ای در کنترل تولید سلول های خونی در مغز استخوان مشاهده می شود. جهش در ژن JAK2  می تواند منجر به انواعی از نئوپلازی های میلوپرولیفراتیو (MPN) شود که شامل ترومبوسیتوز اولیه (ET)، پلی سیتمی ورا (PV) و میلوفیبروزیس اولیه (PMF)می باشند. بنابراین، تشخیص مولکولی این جهش، برای تشخیص انواعی از بیماری های MPN می تواند استفاده شود. به همچنین اثربخشی مداوای دارویی و مهار JAK2  نیز با انجام این تست می تواند بررسی گردد.

شماره رفرانس

• BONJAK2-12
• BONJAK2-24

شرح کیت 

این کیت به صورت تک لوله و بر اساس واکنش زنجیره‌ای پلیمراز (PCR) به صورت Real-Time ساخته شده است. این محصول برای تشخیص جهش شایع اگزون 14 در ژن JAK2 در شرایط آزمایشگاهی تهیه شده است. نتایج تشخیصی به‌دست‌آمده توسط این محصول باید همراه با سایر داده‌های بالینی یا آزمایشگاهی تفسیر شوند.

اصول

تشخیص جهش توسط واکنش زنجیره‌ای پلیمراز (PCR) بر اساس تکثیر ناحیه JAK-2 انجام میگیرد. در واکنش Real-Time PCR محصول تکثیر شده از طریق فلوروسنت شناسایی می‌شوند. مشاهده شدت فلوروسنت در حین واکنش PCR (به صورت Real-Time) تشخیص محصولات در حال تکثیر را بدون نیاز به باز­کردن مجدد لوله­ های واکنش پس از اجرای PCR ممکن می‌سازد.

دامنه کاربرد 

این کیت برای تشخیص جهش JAK2 به ویژه در افراد مبتلا به بیماری‌های میلوپرولیفراتیو همانند پلی‌سیتمی‌ورا (PV)، ترومبوسیتوز ادیوپاتیک، ،میلوفیبروزیس ادیوپاتیک(MF) کاربرد دارد.

کیت JAK2 شرکت بن یاخته دارای ویژگیهای زیر است:

اختصاصیت بالا و تشخیص دقیق

• طراحی شده براساس ناحیه‌ی جهش یافته اگزون 14
• دارای اختصاصیت 100% و تشخیص دقیق 

کنترل داخلی 

• از کنترل داخلی اندوژن در این کیت استفاده می شود که علاوه بر چک مراحل استخراج و PCR از طریق اختلاف Ct آن با ژن JAK2 در تشخیص کمک می نماید.

حساسیت بالا

• حساسیت کیت برابر 1% است. یعنی در صورتیکه جهش JAK2 در 1% نمونه وجود داشته باشد نیز قابل شناسایی است.

مسترمیکس آماده­‌ی مصرف

•  مستر میکس حاوی تمامی مواد تشکیل دهنده‌­ی مورد نیاز برای واکنش PCR
• بدون نیاز به اضافه کردن مواد ضروری برای انجام تست PCR
• تضمین تکرار پذیری نتایج آزمایش
• سازگار با طیف گسترده ای از دستگاه‌های Real-time PCR از جمله، Rotor Gen 3000,6000، MIC و ABI Quantstudio Real-time PCR System

آنالیزنتایج 

آنالیز نتایج توسط نرم افزار مربوطه و بر اساس دستورالعمل دستگاه انجام شود. در کانال رنگی سبز و زرد، آستانه را روی گزینه‌ی 0.02 قرار دهید.

چنانچه نمونه در کانال سبز و زرد دارای منحنی سیگموئیدی و فاز لگاریتمی باشد، آنالیز نتایج بر اساس محاسبه‌ی اختلاف Ct بین دو نتایج کانال سبز و زرد انجام می‌شود. 

1. ابتدا ΔCt را برای کنترل مثبت 0.1% و همچنین نمونه بیمار محاسبه نمایید. برای این منظور، Ct  بدست آمده برای هر نمونه را در کانال زرد از Ct بدست آمده در کانال سبز کسر نمایید.

ΔCt = Ct Green Ch – Ct Yellow Ch

در صورتی که شاهد منفی تا پایان تست منفی بماند ، Ct در کانال سبز را معادل 45 در نظر بگیرید.

 با توجه به توضیحات فوق، آنالیز را به صورت زیر انجام دهید: 

• در صورتی که ΔCT نمونه از ΔCt کنترل مثبت 0.1%، کمتر باشد نمونه از نظر جهش V617F مثبت است.
• در صورتی که ΔCt نمونه از ΔCt کنترل مثبت 0.1%، بیشتر باشد نمونه از نظر جهش V617F منفی است.

2. چنانچه نمونه فقط در کانال زرد دارای منحنی سیگموئیدی و فاز لگاریتمی باشد، نمونه دارای جهش JAK2  نمی باشد.

جدول تفسیر نتایج