کیت تشخیصی HHV-8

ویروس هرپس انسانی 8 (HHV-8) که به آن ویروس هرپس سارکوم کاپوزی (KSHV) نیز می‌گویند، متعلق به خانواده ویروس‌های DNA Herpeseviridae است. اهمیت KSHV در این است که ژن های متعددی را از سلول های میزبان از جمله ژن های رمزگذار IL-6 ، BCL-2 ، سیکلین-D ، گیرنده جفت شده با پروتئین G، عامل تنظیم کننده اینترفرون و پروتئین مهار کننده Fas-ligand (FLIP) و همچنین پروتئین های سنتز DNA از جمله دی هیدروفولات ردوکتاز، تیمیدین کیناز، تیمیدیلات سنتتاز, DNA پلیمراز و بسیاری دیگر را گرفته است.این بیماری باعث ایجاد سارکوم کاپوزی (یک بدخیمی عروقی) و بیماری های لنفوپرولیفراتیو سلول B مانند لنفوم افیوژن اولیه (PEL) و بیماری کاستلمن چند مرکزی (MCD) می شود. احتمال بدخیمی های مرتبط با HHV-8 در میان افراد مبتلا به HIV به طور قابل توجهی بیشتر است. 

ویروس HHV-8 یا KSHV یک ویروس DNA دو رشته ای به طول 165000 باز است که به عنوان گاماهرپس ویروس ها طبقه بندی شده است. گاماهرپسویروسها ویروسهای لنفوتروپیک هستند که در سلولهای اپیتلیال مانند پوست، رگهای خونی و اندامها تحت تکثیر لیتیک قرار میگیرند. این ویروسها میتوانند تا یک عمر در سلولهای میزبان خود در حالت نهفته بمانند. HHV-8 درواقع می تواند، در دوره نهفته در سلول های B-lymphocytic و اندوتلیوم عروقی بماند. سپس سیگنال های مختلفی مانند التهاب به ویژه در شرایط مطلوب مانند نقص ایمنی، سوء تغذیه، پیوند عضو  و غیره ویروس را تحریک می کند که وارد دوره همانندسازی لیتیک شود، که باعث سارکوم کاپوسی (یک بدخیمی عروقی) و بیماری های لنفوپرولیفراتیو سلول B مانند لنفوم افیوژن اولیه (PEL) و بیماری کستلمن مولتی سنتریک (MCD) می شود. احتمال بدخیمی های مرتبط با HHV-8 به طور قابل توجهی در میان افراد مبتلا به HIV بیشتر است؛ با این حال، این بدخیمی ها می توانند بدون عفونت HIV نیز رخ دهند. در موارد نادر که KS در بیماران غیر ایدز تشخیص داده می شود، معمولا در مردان مسن  یا افراد دچار سرکوب سیستم ایمنی بدن، از جمله افراد پیوندی اتفاق می افتد. 

شماره رفرانس

• BONHHV8-24

شرح کیت

این کیت بر اساس واکنش زنجیره‌ای پلیمراز (PCR) به صورتReal-Time  ساخته شده است. پنل تشخیص HHV8 سین‌مورو شامل یک لوله با قابلیت شناسایی  پاتوژن است این لوله حاوی کنترل داخلی است که امکان بررسی صحت انجام تست را در مراحل PCR میسر می سازد. نتایج تشخیصی به‌دست‌آمده توسط این محصول باید همراه با سایر داده‌های بالینی یا آزمایشگاهی تفسیر شوند.

اصول

تشخیص پاتوژن توسط واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) بر اساس تکثیر مناطق خاص ژنوم ویروس میباشد. در واکنش Real-Time PCR محصول تکثیر شده از طریق رنگ‌های فلوروسنت شناسایی می‌شوند. مشاهده شدت فلوروسنت در حین واکنش PCR (به صورت Real-Time)  تشخیص و کمی سازی محصولات در حال تکثیر را بدون نیاز به بازکردن مجدد لوله های واکنش پس از اجرای PCR ممکن می‌سازد.

دامنه کاربرد 

برای شناسایی و تمایز ویژه ویروس هرپس انسانی 8 در نمونه های بالینی بیماران با علائم و نشانه های ویروس هرپس انسانی 8 کاربرد دارد.

کیت تشخیصی HHV8 شرکت بن یاخته دارای ویژگیهای زیر است:

اختصاصیت بالا

• طراحی شده براساس همولوژی با بیش از 95% توالی های مرجع موجود در پایگاه داده NCBI برای ژنوم HHV8 از جمله U75698، U93872 و AF148805 .
• دارای اختصاصیت 100%

کنترل داخلی اگزوژن

• کنترل کلیه­‌ی فرآیند PCR و استخراج از طریق کنترل داخلی (IC) موجود در کیت تشخیصی HHV8

حساسیت بالا

• حد تشخیص تحلیلی کیت تشخیصی HHV8 ، میزان 5copy/reaction است. این بدان معناست که 95٪ احتمال دارد که  5copy/reaction شناسایی شود. 

مسترمیکس آماده­‌ی مصرف

• مستر میکس حاوی تمامی مواد تشکیل دهنده‌­ی مورد نیاز برای واکنش PCR
• بدون نیاز به اضافه کردن مواد ضروری برای انجام تست PCR
• تضمین تکرار پذیری نتایج آزمایش
• سازگار با طیف گسترده ای از دستگاه‌های Real-time PCR از جمله، Rotor Gen 3000,6000، MIC و ABI Quantstudio Real-time PCR System

آنالیز نتایج

 آنالیز نتایج را به صورت زیر تفسیر نمایید:

1. سیگنال فلورسانس در کانال (A.FAM=green) کاملا مشخص است.

نتیجه تست برای ویروس HHV8 مثبت است و نمونه تخلیص شده از پلاسما حاوی ویروس HHV8 بوده است. در این حالت، وجود سیگنال فلورسانس در کانال زرد اهمیت ندارد زیرا در صورت بالا بودن غلظت اولیه ژنوم ویروس HHV8 سیگنال در کانال زرد میتواند بسیار ضعیف باشد یا اصلا وجود نداشته باشد.

1. هیچ سیگنال فلورسانسی در کانال (A.FAM=Green channel) مشاهده نمیشود. در همین حین سیگنال در کانال زرد مربوط به کنترل داخلی قابل مشاهده است. این حالت نشان دهنده عدم وجود ویروس HHV8 در نمونه میباشد. همچنین مثبت بودن سیگنال حاصل از کانال زرد وجود هر گونه مهار کننده واکنش PCR  را منتفی میکند.

1. هیچ سیگنال فلورسانسی در کانال A.FAM و کانال yellow قابل مشاهده نیست. در این حالت هیچ گونه نتیجه گیری در مورد تست نمیتوان انجام داد. تست باید دوباره تکرار شود.